Su un vago paesaggio segnato dal profilo di dolci colline, i tre Santi sono raffigurati con i loro emblemi parlanti: Sant’Agostino indossa i ricchi paramenti di vescovo e reca in mano il libro, alludendo così al suo formidabile impegno culturale e dottrinale, San Giovanni Battista porta la croce con il cartiglio «Ecce Agnus Dei ecce qui tollit peccata mundi» mentre l’agnello sacrificale, suo precipuo attributo iconografico, compare dietro di lui, San Bernardino da Siena veste l’abito bigio dei frati dell’Osservanza, con il monogramma IHS allusivo al nome di Gesù.